Magnetiese serum/plasma -DNA -stel

A-1 Lae konsentrasie selle of virusse in die beginmonster — Verryk die konsentrasie selle of virusse.

A-2 Onvoldoende lys van die monsters-die monsters is nie deeglik met die lysbuffer gemeng nie. Dit word aanbeveel om 1-2 keer deeglik te meng deur pols-vortex. - Onvoldoende sellys wat veroorsaak word deur die afname in aktiwiteit van proteïenase K. - Onvoldoende sellys of proteïenafbraak as gevolg van onvoldoende warm badtyd. Dit word aanbeveel om die weefsel in klein stukkies te sny en die badtyd te verleng om al die residu in die lysaat te verwyder.

A-3 Onvoldoende DNA-adsorpsie. -Geen etanol of 'n lae persentasie in plaas van 100% etanol is bygevoeg voordat die lisaat na die spinkolom oorgedra word nie.

A-4 Die pH-waarde van elueringsbuffer is te laag. -Pas die pH aan tussen 8,0-8,3.

Residuele etanol in die oplosmiddel.

- Daar is 'n oorblywende wasbuffer PW in die oplosmiddel. Die etanol kan verwyder word deur die spinkolom vir 3-5 minute te sentrifugeer en dan by kamertemperatuur of 'n broeikas van 50 for vir 1-2 minute te plaas.

A-1 Die monster is nie vars nie. - Trek 'n positiewe monster -DNA uit as kontrole om vas te stel of die DNA in die monster afgebreek is.

A-2 Onbehoorlike voorbehandeling. - Word veroorsaak deur oormatige vloeibare stikstofmaling, vogherwinning of 'n te groot hoeveelheid van die monster.

Die voorbehandelings moet vir verskillende monsters wissel. Vir plantmonsters moet u deeglik met vloeibare stikstof maal. Vir diermonsters, homogeniseer of maak dit fyn in vloeibare stikstof. Vir monsters met selwande wat moeilik is om te breek, soos G+ -bakterieë en gis, word voorgestel dat lisosiem, lytikase of meganiese metodes gebruik word om die selwande te breek.

4992201/4992202 Plant Genomic DNA Kit gebruik 'n kolomgebaseerde metode wat chloroform benodig vir die ekstraksie. Dit is veral geskik vir verskillende plantmonsters, sowel as plant droë poeier. Hi-DNAsecure Plant Kit is ook op kolomme gebaseer, maar sonder om fenol/chloroform te onttrek, is dit veilig en nie-giftig. Dit is geskik vir plante met 'n hoë polisakkaried en polifenolinhoud. 4992709/4992710 DNAquick Plant System gebruik 'n vloeistofgebaseerde metode. Fenol/chloroform ekstraksie is ook nie nodig nie. Die suiweringsprosedure is eenvoudig en vinnig, sonder 'n beperking vir die beginbedrae van die monster, sodat gebruikers die hoeveelheid buigsaam kan aanpas volgens die eksperimentele vereistes. Groot grootte gDNA -fragmente kan verkry word met 'n hoë opbrengs.

Die genomiese DNA is onttrek uit verskillende volumes menslike volbloedmonsters deur TIANamp Blood DNA Kit. Die resultate is soos volg. Die resultate word slegs as verwysing gelys; die werklike ekstraksieresultate hang af van die toestande van monsters.

Die DNA -ekstraksie van bloedklonte kan uitgevoer word met behulp van die reagense in hierdie twee stelle deur eenvoudig die protokol te verander na die spesifieke instruksie vir die ontginning van bloedklonte. Die sagte kopie van die DNA -ekstraksieprotokol vir bloedklonte kan op versoek uitgereik word.

Skors die vars monster met 1 ml PBS, normale soutoplossing of TE -buffer. Homogeniseer die monster volledig deur 'n homogeniseerder en versamel die neerslag aan die onderkant van 'n buis deur te sentrifugeer. Gooi die supernatant weg en resuspendeer die neerslag met 200 ul buffer GA. Die volgende DNA -suiwering kan volgens die instruksie uitgevoer word.

Vir die suiwering van gDNA in plasma-, serum- en liggaamsvloeistofmonsters word TIANamp Micro DNA Kit aanbeveel. Vir die suiwering van virus -gDNA uit serum-/plasmamonsters word TIANamp Virus DNA/RNA Kit aanbeveel. Vir die suiwering van bakteriële gDNA uit serum- en plasmamonsters word TIANamp Bacteria DNA Kit aanbeveel (lisosiem moet ingesluit word vir positiewe bakterieë). Vir speekselmonsters word Hi-Swab DNA Kit en TIANamp Bacteria DNA Kit aanbeveel.

DNAsecure Plant Kit of DNAquick Plant System word aanbeveel vir die onttrekking van swamgenome. Vir die onttrekking van gisgenome word TIANamp Yeast DNA Kit aanbeveel (lytikase moet self voorberei word).