RNAclean Kit

A-1 Sellysis of homogenisering is nie voldoende nie

---- Verminder monsterverbruik, verhoog die hoeveelheid lyseringsbuffer, verhoog homogenisering en tydstyd.

A-2 Voorbeeldhoeveelheid is te groot

---- Verminder die hoeveelheid monster wat gebruik word, of verhoog die hoeveelheid lysisbuffer.

A-1 Onvoldoende sellys of homogenisering

---- Verminder monsterverbruik, verhoog die hoeveelheid lyseringsbuffer, verhoog homogenisering en tydstyd.

A-2 Voorbeeldhoeveelheid is te groot

---- Raadpleeg die maksimum verwerkingskapasiteit.

A-3 RNA word nie heeltemal uit die kolom uitgeskakel nie

---- Nadat u RNase-vrye water bygevoeg het, laat dit 'n paar minute staan ​​voordat dit sentrifugeer.

A-4 Etanol in die oplosmiddel

---- Na spoel, sentrifugeer weer en verwyder die wasbuffer soveel as moontlik.

A-5 Selkweekmedium word nie heeltemal verwyder nie

---- As u selle versamel, moet u die kweekmedium soveel as moontlik verwyder.

A-6 Die selle wat in RNAstore gestoor word, word nie effektief gesentrifugeer nie

---- RNA-winkeldigtheid is groter as die gemiddelde selkweekmedium; dus moet die sentrifugale krag verhoog word. Dit word voorgestel om by 3000x g te sentrifugeer.

A-7 Lae RNA-inhoud en oorvloed in die monster

---- Gebruik 'n positiewe monster om vas te stel of die lae opbrengs deur die monster veroorsaak word.

A-1 Die materiaal is nie vars nie

---- Vars weefsels moet onmiddellik of onmiddellik in vloeibare stikstof in die RNAstore-reagens gestoor word om die ekstraksie-effek te verseker.

A-2 Voorbeeldhoeveelheid is te groot

---- Verminder die hoeveelheid monster.

A-3 RNase besmettingn

---- Alhoewel die buffer in die kit nie RNase bevat nie, is dit maklik om RNase te besoedel tydens die ekstraksieproses en moet dit versigtig hanteer word.

A-4 Elektroforese besoedeling

---- Vervang die elektroforese-buffer en maak seker dat die verbruiksgoedere en die laaibuffer vry is van RNase-besmetting.

A-5 Te veel laai vir elektroforese

---- Verminder die hoeveelheid monsterlading, die laai van elke put mag nie 2 μg oorskry nie.

A-1 Voorbeeldbedrag is te groot

---- Verminder die hoeveelheid monster.

A-2 Sommige monsters het 'n hoë DNA-inhoud en kan met DNase behandel word.

---- Voer RNase-vrye DNase-behandeling uit na die verkrygde RNA-oplossing, en die RNA kan direk gebruik word vir daaropvolgende eksperimente na behandeling, of kan verder gesuiwer word deur RNA-suiweringsstelle.

Vir glasware, gebak by 150 ° C vir 4 uur. Vir plastiekhouers, gedompel in 0,5 M NaOH vir 10 minute, dan deeglik gespoel met RNase-vrye water en dan gesteriliseer om RNase heeltemal te verwyder. Die reagense of oplossings wat in die eksperiment gebruik word, veral water, moet vry wees van RNase. Gebruik RNase-vrye water vir alle reagenspreparate (voeg water by 'n skoon glasbottel, voeg DEPC by tot 'n finale konsentrasie van 0,1% (V/V), skud oornag en autoklaaf).